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¿Qué función tiene el magnesio en la PCR?
f) Cloruro de magnesio. El MgCl2 es un cofactor necesario para la actividad enzimática de las DNA polimerasas. La concentración óptima de MgCl2 debe determinarse empíricamente para cada polimerasa, secuencia y par de cebadores.
¿Qué es el buffer en PCR?
El buffer es la solución amortiguadora que se usa en la reacción y generalmente está compuesta de Tris-HCL (pH = 8) cuya concentración final de trabajo debe ser 1X. También se usan otros buffers de composición distinta que son fácilmente comprados en el mercado.
¿Qué es un primer en la PCR?
Un iniciador o cebador es una secuencia corta de ADN de cadena simple que se utiliza en una reacción en cadena de la polimerasa (PCR). En el método PCR se emplea un par de cebadores para hibridar con el ADN de la muestra y definir la región del ADN que será amplificada. También se les conoce como oligonucleótidos.
¿Qué es un ADN polimerasa de alta fidelidad?
La polimerasa de ADN Pfu (PfuPol) es una enzima encontrada en la arqueobacteria hipertermófila Pyrococcus furiosus, donde funciona copiando el ADN del organismo durante la división celular.
¿Qué es la polimerasa Taq y para qué sirve?
Por lo tanto, el uso de la polimerasa Taq fue la idea clave que permitió hacer aplicable el proceso de PCR a una gran variedad de problemas de biología molecular relacionados con el análisis de ADN.
¿Qué es la polimerasa aislada?
Aunque la polimerasa fuera aislada de T. Aquaticus, la que se emplea en los laboratorios proviene de bacterias E. coli a las que se les ha insertado el gen de la Taq polimerasa, estas bacterias crecen en unas condiciones mucho más fáciles de conseguir, por lo que se ahorra en su producción.
¿Cuál es la función de la polimerasa?
La ADN polimerasa ayuda en la replicación del ADN y se encuentra en células que se dividen de forma autónoma. Conecta los nucleótidos para formar una cadena de ADN. Durante la PCR, el ADN está sujeto a procesos no tan agradables como la desnaturalización por calentamiento a altas temperaturas y recocido.
¿Quién inventó el método de la reacción en cadena de la polimerasa?
En 1993 Kary Mullis recibió el premio Nobel de química “por su invención del método de la reacción en cadena de la polimerasa”. Thermus aquaticus: es una bacteria termófila, GRAM negativa (para saber que significa esto puedes leer nuestro artículo aquí ), aerobia y heterótrofa.