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¿Cuál es la función de la hibridación?
La hibridación es un proceso por el cual se combinan dos cadenas complementarias simples de ácidos nucleicos (ADN o ARN) y se permite que formen una única molécula de doble cadena por apareamiento de sus bases.
¿Qué es una sonda genética?
Una sonda es una secuencia de ADN o ARN de cadena simple que se utiliza para encontrar su secuencia complementaria en el genoma de una muestra. La sonda se coloca en contacto con la muestra bajo condiciones que permitan que la secuencia de la sonda se hibriice con su secuencia complementaria.
¿Cómo se hace la técnica Fish?
Hibridación fluorescente in situ (FISH) La técnica se basa en exponer los cromosomas a una pequeña secuencia de ADN llamado sonda que tiene una molécula fluorescente pegada a ella. La secuencia de la sonda se une a su secuencia correspondiente en el cromosoma.
¿Qué son las sondas de hibridación de ADN?
Sondas de hibridación de ADN utilizado en microarreglos se refieren a ADN covalentemente a una superficie inerte, como láminas de vidrio recubiertos o chips de genes, y que es un blanco móvil de ADNc hibridado.
¿Cómo se sintetiza una sonda?
Dependiendo del método que se use, la sonda puede ser sintetizada utilizando el método de fosforamidita o generada y etiquetada mediante amplificación por PCR y la clonación (los métodos más antiguos).
¿Qué son las sondas y para qué sirven?
También las sondas se pueden utilizar para analizar el genoma, por ejemplo para saber si hay copias extras de una región en particular, como a menudo ocurre en los cánceres, o en ocasiones para constatar la falta de copias de ciertas partes del genoma, lo que sucede en algunos síndromes hereditarios y también en cáncer.
¿Cómo se preparan los tejidos para la penetración de la sonda?
El ARN se degrada por las ARNasas, y una gran cantidad de este enzima se encuentra en nuestras manos, por lo que tendremos que usar guantes y todo el material que se use ha de estar lbre de RNAsas (con un autoclavado se pueden inactivar). A los tejidos se les trata antes para prepararlos para la penetración de la sonda. Por ejemplo, con proteasas.