Como se realiza la HPLC?

¿Cómo se realiza la HPLC?

La cromatografía líquida (HPLC), es una técnica utilizada para separar los componentes de una mezcla. Consiste en una fase estacionaria no polar (columna) y una fase móvil. La fase estacionaria es sílica que se ha tratado con RMe2SiCl . La fase móvil actúa de portador de la muestra.

¿Qué es la resolucion en HPLC?

La resolución indica la capacidad de una columna para separar los picos de interés. Permite conocer si se ha conseguido la separación en la línea de base o no. La resolución indica la capacidad de una columna para separar los picos de interés.

¿Cómo mejorar resolucion en HPLC?

Se consigue mejorar la resolución de la columna aumentando el número de platos. Esto se puede conseguir aumentando la longitud (L) de la columna, lo cual aumentaría el tiempo necesario para la separación, o disminuyendo la altura de plato (H).

¿Cuál es la capacidad de separación de una columna HPLC?

Tamaño de partícula (d p)= 5 µm Mantener capacidad de separación entre columna HPLC y columna UPLC  Capacidad de Separación: Relación entre Longitud y tamaño de partícula  Elegir columna UPLC con la misma relación L/dp que columna HPLC L = 150000 = 30000 d p 5 ©2012 Waters Corporation 4 Escalado de HPLC a UPLC™ – L/dp constante

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¿Cuáles son los diferentes usos de las columnas de HPLC?

Los diferentes usos de las columnas de HPLC. Los materiales de relleno de las columnas. Cómo seleccionar el diámetro de partícula adecuado. Cómo seleccionar el diámetro interno de columna adecuado. Cómo seleccionar la longitud de columna correcta.

¿Qué es la eficiencia de una columna?

Eficiencia o número de platos teóricos (N) La eficiencia de la columna se utiliza para comparar el rendimiento de diferentes columnas. Se expresa por medio del número de platos teóricos (N). Las columnas con un número alto de platos son más eficientes.

¿Cuáles son los parámetros que influyen sobre la eficiencia de una columna?

Una columna con un valor N alto generará picos más estrechos para un determinado tiempo de retención que una columna con un valor N más bajo. Parámetros que influyen sobre la eficiencia de la columna: • Longitud de la columna (a mayor longitud, mayor eficiencia). • Tamaño de partícula (a menor tamaño de partícula, mayor eficiencia).