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¿Cómo se mide la integridad del ADN?
La electroforesis en gel de agarosa al 0,7\% (p/v) permite la valoración de la integridad de la muestra de ADN. Se considera que una muestra de ADN es íntegra cuando su perfil en una electroforesis en gel de agarosa se corresponde a una banda discreta.
¿Que reactivos se utilizan para visualizar las moléculas de ADN cuándo se someten a electroforesis en geles de agarosa?
El bromuro de etidio (BrEt) es un agente intercalante (se intercala entre las ba- ses nitrogenadas) que se usa como colorante fluorescente para la visualización de ácidos nucleicos en geles de agarosa y poliacrilamida.
¿Por qué los fragmentos de ADN atraviesan el gel más rápido que los grandes?
Puesto que todos los fragmentos de ADN tienen la misma cantidad de carga por masa, los fragmentos pequeños atraviesan el gel más rápido que los grandes. Cuando un gel se tiñe con un pigmento que se une al ADN, los fragmentos de ADN pueden verse como bandas, las cuales representan un grupo de fragmentos de ADN del mismo tamaño.
¿Cuál es la diferencia entre los fragmentos cortos y los grandes del gel?
Conforme corre el gel, los fragmentos más cortos de ADN viajarán más rápido a través de los poros de la matriz del gel que los fragmentos más grandes. Después de un rato que ha corrido el gel, los fragmentos más cortos de ADN estarán más cerca del extremo positivo del gel y los más largos se mantendrán cerca de los pozos.
¿Cómo saber cuántos pares de bases tiene un fragmento de ADN?
Cuando un gel se tiñe con un pigmento que se une al ADN y se coloca bajo luz UV, los fragmentos de ADN brillarán, lo cual nos permite ver el ADN presente en distintos lugares a lo largo del gel. El pb que está al lado de cada número en el marcador indica cuántos pares de bases tiene el fragmento de ADN.
¿Cómo se separan las moléculas del gel?
Con base en su tamaño y carga, las moléculas se desplazarán por el gel en diferentes direcciones o a distintas velocidades, con lo que se separan unas de otras. [¿De dónde viene el nombre «electroforesis»?] Todas las moléculas de ADN tienen la misma cantidad de carga por masa.