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¿Cómo se purifica un plásmido?
El DNA plasmídico se purificará a partir de bacterias portadoras y el RNA a partir de células humanas cultivadas en el laboratorio. Los ácidos nucleicos se separarán por tamaño mediante electroforesis en geles de agarosa y se visualizarán por irradiación con luz UV en presencia de bromuro de etidio.
¿Cómo se extraen los plásmidos?
Existen diferentes técnicas para aislar el ADN plasmídico y uno de los métodos más usado es el método de extracción por lisis alcalina. Este método aprovecha las diferencias en el tamaño y la superhelicidad que es el grado de torsión que sufre el ADN plasmídico en contraste con el cromosomal.
¿Cómo se purifica el ARN?
El RNA se purifica en tres pasos: un paso de lisis celular y homogenización con la Solución de Chomczynski con Fenol; adición de Cloroformo, el cual produce la formación de dos fases, una acuosa, que contiene el RNA, y una orgánica, que contiene el DNA y las proteínas; y un último paso de precipitación con Alcohol iso- …
¿Cómo precipitar ARN?
Para precipitar el ARN, las muestras se incubaron toda la noche a 4°C. El precipitado se obtuvo centrifugando las muestras a 10 000 rpm por 20 min a 4°C y se resuspendió en agua tratada con DEPC.
¿Cuáles son las ventajas de los plásmidos?
Cada plásmido contiene al menos una secuencia de ADN que sirve como un origen de replicación lo cual permite al ADN ser reproducido en forma independientemente del cromosoma. Poseen genes que dan ventajas a las bacterias que los contienen, de lo que hablaremos más adelante.
¿Cuál es el papel de los plásmidos en la evolución de las bacterias?
Los plásmidos, por tanto, han sido una pieza básica de la evolución de las bacterias, una herramienta que les ha permitido adaptarse al entorno que han tenido «un papel clave en la diseminación de los genes de resistencia a los antibióticos».
¿Por qué los plásmidos son tan resistentes a los antibióticos?
«Los plásmidos llevan muchos genes de resistencia de modo que, cuando una bacteria adquiere un plásmido con genes de resistencia a cinco o seis antibióticos, se convierte de golpe en una bacteria resistente a esos cinco o seis fármacos», explica el investigador.
¿Cuáles son los atributos de vida de los plásmidos?
En comparación con los virus y viroides que dependen del genoma del huésped para ser replicados, los plásmidos se replican independientemente del genoma, por tanto los plásmidos cumplirían con un atributo de vida: la reproducción.